Проблемы антибиотикотерапии респираторного микоплазмоза птиц
Белкин В. А. к.в. н., НПП «АВИВАК»
РЕЗЮМЕ
Проведен анализ чувствительности референтных и полевых штаммов, возбудителей респираторного микоплазмоза (РМ), к наиболее часто применяемым в производстве противомикробным средствам. Учитывая значение минимальной ингибирующей концентрации, установлена устойчивость к большинству исследованных препаратов. Наиболее эффективными оказались препараты содержащие тиамутин и китасамицин. Необходимо перед использованием противомикробных средств обязательно уточнять минимальную ингибирующую концентрацию, чтобы получить ожидаемый терапевтический эффект.
ВВЕДЕНИЕ
Одним из эффективных средств контроля РМ в птицеводстве являются химиотерапевтические препараты (ХТП). Применение их в птицеводстве позволяет значительно повысить экономические показатели при выращивании птицы. Однако в последнее время в птицеводстве возникает проблема неэффективности применяемых препаратов. Успехи противомикоплазменной терапии последних 20-и лет практически достигли нулевой отметки. Это может быть проиллюстрировано минимум по 3-м характеристикам: динамикой практической значимости антимикоплазменных препаратов, количеством новых ХТП и эффективностью контроля микоплазмоза. Уже пятьдесят лет применяют в ветеринарной практике тилозин. Самыми новыми, на данный момент, антимикоплазменными ХТП являются фторхинолоны, а им уже более 20-и лет. Они модифицируются, но им придаются полезные свойства в основном по спектру противомикробного действия.
Учитывая давность использования этих препаратов в ветеринарной практике и часто бессистемное, с нарушением доз и схем их применение, оно не только не эффективно, но и наносит существенный ущерб за счет развития резистентности у вида M. gallisepticum. Определение чувствительности микоплазм к ХТП является основой для их практического применения. Для рационального подбора средств эффективной антимикоплазменной терапии и профилактики возникновения и распространения инфекции необходимо знать чувствительность выделенных культур возбудителей к антимикробным препаратам. Результаты определения чувствительности должны иметь количественное выражение. Значимость этой работы заключается в том, что эффективность ХТП будет зависеть не только от правильно определенной in vitro чувствительности, но и от ряда других, иногда трудно прогнозируемых факторов: фенотипической и генотипической изменчивости возбудителя и особенностей фармакокинетики и фармадинамики препаратов.
Целью проведенных исследований явилось выделение полевых культур РМ и определение эффективности к наиболее часто применяемым ХТП по отношению к ним в сравнении с референтными штаммами микоплазм.
М АТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Для выделения и клонирования микоплазм использовали питательные среды и методики, принятые в микоплазмотологии. Идентификацию микоплазм проводили методом РА с применением специфических сывороток и референтных штаммов микоплазм по стандартным методикам. Испытание проводили на 4-х клонированных изолятах М.gallisepticum, выделенных от птиц нескольких птицефабрик, одного от зарянки Eritracus rubecula и двух референтных штаммов – S6 и PG -31.
Оценку эффективности ХТП определяли с использованием терапевтического индекса «Т» по формуле Т=МИК/К.
Где: МИК – минимальная ингибирующая концентрация (мкг/мл)
К – концентрация данного антибиотика (мкг/мл) в крови.
Эффективность химиопрофилактики оценивается положительно, если Т< 0,3.
Результаты концентрации некоторых антибиотиков в крови кур представлены в таблице №1
Концентрация антибиотиков в крови кур (К, мкг/мл) после введения среднетерапевтических доз препарата
Таблица 1
№ п/п |
Антибиотик |
К мкг/мл |
1 |
Гентамицин |
6 - 8 |
2 |
Тетрациклин |
3 - 5 |
3 |
Доксициклин |
3 - 5 |
4 |
Китасамицин |
1,3 - 3 |
5 |
Тиамутин |
0,78-1,2 |
6 |
Тилозин |
0,12- 0,6 |
7 |
Энрофлоксацин |
1,5-1,75 |
Для наиболее значимых для профилактики РМ препаратов тилозина и тиамутина этот показатель установлен при выпаивании с водой в концентрации 0,05% и 0,025% соответственно.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЯ
Результаты исследований МИК антимикоплазменных препаратов in vitro к референтным и полевым штаммам М.gallisepticum представлены в таблице 2.
Таблица 2
Минимальные ингибирующие концентрации антимикоплазменных препаратов in vitro
№ п/п |
Название антибиотика, серия, №, срок годности |
Основное действующее вещество мг/г |
МИК мкг/мл |
|
Референт-ные |
Полевые |
|||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
1 |
Macrolan |
Tylosin tartrate 1000 |
>5 |
>10 |
2 |
Тилозин тартрат |
Tylosin tartrate 800 |
>5 |
>10 |
3 |
Витроцил - 352546 |
Энрофлоксацин 100 |
0,025 |
0,025 |
4 |
Тилан BJ 120201, 03.10. |
Tylosin tartrate 1000 |
>5 |
>10 |
5 |
Квинокол гидро Revex NO8/4-4 |
Энрофлоксацин 100 |
0,625 |
0,625 |
6 | Тилозин тартрат 09061089050, АО Биовет (Болгария) 06.12 |
Tylosin tartrate 800 |
>5 |
>10 |
7 | Препарат зашифрован | Tylosin tartrate 1000 |
>5 |
>10 |
8 | Препарат зашифрован | Доксициклина гидрохлорид 200 |
0,625 |
1,25 |
9 | Препарат зашифрован | Доксициклина гидрохлорид -100 мг + Tylosin tartrate 100 | >2,5 | >5 |
10 | Препарат зашифрован | Флорфеникол 100 | 0,4 | 1,6 |
11 | Препарат зашифрован | Энрофлоксацин 100 | 0,02 | 0,078 |
12 | Препарат зашифрован | Тилмикозин-фосфат 250 | 0,016 | 0,016 |
13 | Тиамутин тартрат | Тиамулин 1000 | 0,009 | 0,036 |
14 | Пульмотил | Tylosin tartrate 1000 | 0,19 | 3,125 |
15 | Колифлокс | - | 15,625 | 31,25 |
16 | Окситетрациклин гидрохлорид | Тетрациклин | 15,625 | 15,625 |
17 | Гентамицин БОУ | Гентамицин 1000 | >100 | >100 |
18 | Тиланик | Tylosin tartrate 1000 | 6,25 | >10 |
19 | Тиланик 02.01.10-02.01.13 | Tylosin tartrate 1000 | 0,2 | 0,78 |
20 | Китасамицин | Китасамицин тартрат 1000 | 0.09 | 0.19 |
21 | Тетрациклин + тиамулин | Тиамулин 200 | 0,0125 | 0,025 |
22 | Тетрациклин + фармазин | Tylosin tartrate 200 | 1,25 | 3,8 |
Расчет эффективности применения антибиотиков на примере окситетрациклина гидрохлорида.
МИК тетрациклина= 15.625.
Известно, что величина К тетрациклина при использовании среднеарифметических доз – 4 мкг/мл (3-5) таблица 1, максимальных доз – 10 мкг/мл.
Следовательно, в нашем случае терапевтический индекс будет равен:
Т=15.625:4=3.9 (>0,3), т.е. возбудитель микоплазмоза устойчив к антибиотику и лечение тетрациклином не даст антимикробного эффекта, даже при использовании максимальных доз (Т=15.625:10=1,5625).
Руководствуясь приведенным примером и данными таблиц с МИК антибиотиков, легко можно рассчитать их эффективность.
Из представленных в таблице 2 результатов исследований видно, что из 23 исследованных антимикоплазменных препаратов или их комбинаций только китасамицин и тиамулин были эффективны в отношении к полевым штаммам M.gallisepticum(Т<0,3). При этом их МИК к референтным штаммам была в среднем в 2-4 ниже, чем к полевым, что указывает на развитие резистентности. Ни один из препаратов, содержащий тилозин,не был эффективен в отношении полевых штаммов микоплазм.
Дополнительно проведено сравнительное испытание 4 антибиотиков макролидной группы в отношении референтных и полевых штаммов M.gallisepticum. Результаты представлены в табл. 3.
Таблица 3;
Сравнительное испытание 4 антибиотиков макролидной группы в отношении референтных и полевых штаммов M.gallisepticum
№/пп |
Название антибиотика |
Срок годности серия №, производитель |
МИК мкг/мл |
|||
S6 |
Pg-31 |
Полевой |
Полевой |
|||
1 |
Тилозина тартрат гранулят |
09031089015 |
10 |
6,25 |
6,25 |
>10 |
2 |
Тилозина тартрат гранулят |
0210281330 |
25 |
25 |
50 |
>50 |
3 |
Макролан |
ns 252325 |
7,8 |
7,8 |
7,8 |
15,6 |
4 |
Макролан |
б/н |
2 |
2 |
2 |
6,25 |
Полученные данные наглядно свидетельствуют о том, что даже одинаковые препараты от одного производителя могут существенно отличаться по своей антимикробной активности как к полевым, так и референтным штаммам микоплазм.
ВЫВОДЫ
Для рационального подбора средств эффективной антимикоплазменной терапии и профилактики распространения инфекции необходимо проводить выделение циркулирующего в хозяйстве возбудителя респираторного микоплазмоза с последующим определением его чувствительности к антимикробным препаратам с установлением минимальной ингибирующей концентрации.
Подготовлено по материалам «VIого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com