Экспериментальные и производственные испытания вакцины «АВИВАК-ИЛТ»

Панкратов С. В., Крон Н. В., Гаврилов С.Н., НПП «АВИВАК»

ВВЕДЕНИЕ

Инфекционный ларинготрахеит (ИЛТ) – вирусная контагиозная респираторная болезнь, поражающая чаще всего отряд куриных. В естественных условиях куры, фазаны и павлины заболевают в любом возрасте, но особенно заражению подвержена птица однодвухмесячного возраста. Характерными клиническими признаками являются: кашель, хрипящие и свистящие звуки, дыхание с открытым клювом и конъюнктивиты. При патологоанатомическом вскрытии обнаруживают поражения слизистых оболочек гортани, трахеи, реже носовой полости. Течение болезни бывает сверхострое, острое, подострое и хроническое. Домашние и дикие голуби, утки, гуси и синантропные птицы также подвержены заболеванию и поэтому являются резервуаром инфекции.

Возбудитель относится к роду альфагерпесвирусов, вызывающих латентную инфекцию. Латентное течение болезни позволяет вирусу ИЛТ практически пожизненно циркулировать в организме зараженной птицы, что значительно усложняет меры борьбы с инфекцией. Однажды попав в хозяйство, она приобретает стационарный характер. Экономике хозяйства болезнь может приносить существенные убытки, которые складываются из потерь от недополучения яичной продукции и мяса, выбытия птиц и затрат на проведение противоэпизоотических мероприятий.

Меры борьбы с ИЛТ являются комплексными: комплектация птицепоголовья из благополучного хозяйства-репродуктора, тщательная дезинфекция поступающих инкубационных яиц в инкубатории, соблюдение ветеринарно-санитарных правил при выращивании птицы, минимизация технологических стрессов химиопрофилактика бактериальных болезней, в первую очередь, колибактериоза и респираторного микоплазмоза, и специфическая профилактика данного заболевания.

В Российской Федерации для специфической профилактики ИЛТ до 2006 г. Были разрешены к применению живые эмбриональные вакцины из штаммов «ВНИИБП», «О» и клона «НТ». Первые две вакцины обладают высокой иммуногенностью, но недостатком их является остаточная реактогенность. Напротив, клон «НТ» не реактогенен, но не всегда обеспечивает достаточную иммуногенность.

В 2006 г в НПП «АВИВАК» путем модификации вакцинного штамма «ВНИИБП» перемежающимися пассажами в клеточной культуре и на СПФ- эмбрионах кур получен штамм, в котором устранены недостатки исходного биопрепарата. Преимуществом является и то, что в утвержденной Россельхознадзором инструкции (от 19. 06. 2006 г.) по применению вакцины против инфекционного ларинготрахеита птиц живой сухой «АВИВАК-ИЛТ» разрешается оценивать результаты иммунизации по титру антител в сыворотках крови методом ИФА и он должен быть не ниже двукратного минимального положительного показателя, предусмотренного в инструкции по применению конкретного диагностического набора. А как известно, принятый до этого времени метод оценки напряженности иммунитета в реакции вирусной нейтрализации трудоемок, дорогостоящий и может быть выполнен только в специализированных лабораториях.

В предыдущей нашей публикации (Горелов С. В. и соавт., 2007) мы информировали о первых результатах применения вакцины «АВИВАК-ИЛТ». В плане контроля выпускаемого биопрепарата согласно нормативной документации (НД), представляем результаты определения реактогенности и антигенной активности живой сухой вакцины против инфекционного ларинготрахеита птиц «АВИВАК-ИЛТ», серии №3, инфекционной активностью 5,8 lg ЭИД 50/см3, изготовленной 06.2008 г., а также результаты применения ее в птицехозяйствах с различной технологической направленностью.

М АТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИСЛЕДОВАНИЙ
Определение реактогенности и антигенной активности вакцины проводили на цыплятах 30-дневного возраста, полученных из фермерского хозяйства благополучного по инфекционным болезням птиц, в котором не проводится вакцинация против ИЛТ.

Для определения реактогенности вакцины было сформировано две группы цыплят по 10 голов в каждой. Цыплятам 1-й группы вакцину вводили с помощью глазной пипетки интраокулярно (в один глаз) в дозе 10000 ЭИД50/см3 и объеме 0,1 см3 однократно, которая в 10 раз превышала иммунизирующую, 2-й группы – аналогично физиологический раствор. За вакцинированной птицей вели наблюдение в течение 20 дней, после чего провели эвтаназию, вскрытие и оценку состояния слизистых оболочек верхних дыхательных путей, воздухоносных мешков и легких.

Для определения антигенной активности было сформировано также две группы цыплят, по 10 голов в каждой. Цыплятам первой группы вводили вакцину, разбавленную фосфатно-буферным раствором, в дозе 1000 ЭИД50/см 3 и объеме 0,1 см 3 интраокуляно (в один глаз), однократно; а второй группе – аналогично только физиологический раствор.

Сыворотку крови от птиц брали непосредственно перед вакцинацией и через месяц после вакцинации. Титры антител к вирусу ИЛТ определяли методом иммуноферментного анализа тест-системой «БиоЧек».

Р ЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЙ
Изготовленная живая сухая вакцина «АВИВАК-ИЛТ», серии №3 от 06. 2008 г. прошла все необходимые контроли на формирование таблетки, влажность, растворимость, стерильность и инфекционную активность.

Клинические наблюдения, которые проводили за подопытной птицей в указанные сроки, не выявили у нее отклонений по сравнению с птицей в интактном контроле. При патологоанатомическом вскрытии у цыплят подопытной группы не обнаружено видимых изменений на слизистой оболочке носовых раковин, надгортанника, трахеи, бронхов, воздухоносных мешков и альвеол, легких, характерных для инфекционного ларинготрахеита. Физиологическое развитие цыплят соответствовало таковому в контрольной группе.

Результаты исследования антигенной активности вакцины показали, что среднее значение титров антител в сыворотках крови цыплят к вирусу ИЛТ через один месяц после вакцинации составило в разведении 1: 3455 (1898-5095), а в контрольной группе они вообще отсутствовали. Как видим, среднее значение титров антител у всех цыплят вакцинированной группы было значительно выше показателя 1:1071, который является положительным в тест-системе «БиоЧек» и указывает на то, что все иммунизированные цыплята приобрели высокий уровень гуморального иммунитета.

Полученный в эксперименте результат определения антигенной активности вакцины «АВИВАК-ИЛТ» является свидетельством того, что вакцина вызывает у цыплят формирование протективного уровня сывороточных антител. Оценка их защитных свойств не всегда однозначна. Одни исследователи, которых большинство, считают, что на основании данных ИФА можно опосредованно оценивать выходной контроль производственных серий вакцины и прогнозировать напряженность иммунитета у вакцинированной птицы как в экспериментальных исследованиях, так и в условиях хозяйств (2, 3, 4). По другим данным результаты ИФА не коррелирует с защитой, так как при ИЛТ важен клеточный иммунитет (5).

С 2008 г. вакцина «АВИВАК-ИЛТ» успешно применяется в ряде хозяйств яичного и мясного направлений в различных регионах страны. По данным серологических исследований, проведенных в НПП «АВИВАК», напряженность гуморального иммунитета у привитых птиц колеблется в диапазоне от 85% до 100%.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Живая сухая вакцина против инфекционного ларинготрахеита птиц «АВИВАК-ИЛТ», примененная интраокулярно в дозе 10000 ЭИД 50/ см3 и объеме 0,1 см3 однократно, является ареактогенной, и в иммунизирующей дозе 1000 ЭИД 50 /см3 при аналогичном введении вызывает, через месяц после вакцинации 100% иммунитет. Применение вакцины «АВИВАК-ИЛТ» в хозяйствах различной технологической направленности способно обеспечить достаточно высокую специфическую защиту от полевого возбудителя ИЛТ.

ЛИТЕРАТУРА.
1. Горелов С. В., Терюханов А. Б., Панкратов С. В. Принципы и перспективы борьбы с инфекционным ларинготрахеитом кур, Росс. ветерин. журн., 2007, 1: 14-15.
2. Бочарников А. В., Кулаков В. Ю, Оковытая Т. В. Опосредованная оценка напряженности иммунитета против инфекционнго ларинготрахеита птиц. Ветеринария, 2004, 1:30-31.
3. Решетникова В. Н., Дудников С. А., Меньщикова А. Э., Ирза В. Н. Изучение эпизоотической ситуации по инфекционному ларинготрахеиту птиц на птицефабриках РФ с применением ИФА. 2006, 11: 12-14.
4. Чурин А. И., Панова О. А., Мавликаев Р. Г. и др. Обнаружение антител к антигенам вируса инфекционного ларинготрахеита в сыворотках крови домашних, диких и синантропных птиц. Ветеринария, 2006, 12 : 48-49.
5. Shane S. M. Новое в изучение заболеваний птицы. World poultry. 2005, 17, 7:3-5.

Подготовлено по материалам «VIого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com