Чувствительность кур различной генеалогии к болезни Марека и определение их генетической структуры по группам крови

Белецкая А.В., к.б.н., Подстрешный А.П., к.б.н. Институт птицеводства НААН Украины

В остром опыте проверена чувствительность цыплят четырех популяций различной генеалогии к вирусу болезни Марека. Наименьший отход птицы от заболевания наблюдался у полтавских глинистых кур- 62.5%. У кур других породных групп гибель от болезни Марека колебалась от 72.5-74.6 до 87.0%. В 3-х группах кур выявлено по одному эритроцитарному антигену, которые можно рассматривать как ассоциированные с резистентностью к болезни Марека.

В последние годы в стратегии борьбы с болезнью Марека (БМ) значительное внимание уделяется созданию генетически устойчивых линий кур [1,2,3]. Это обусловлено прежде всего тем, что разработка эффективных специфических средств профилактики не успевает за быстрой эволюцией полевых вирусов, которые усиливают свои патогенные свойства [4, 5]. Высказывается обеспокоенность, что в будущем традиционных способов борьбы с заболеванием может быть недостаточно [4,6].

Предполагают, что к проявлению генетической резистентности при БМ имеют отношение разные локусы: одни из них связаны с главным комплексом гистосовместимости (ГКГ) [7], другие – не имеют отношения к ГКГ, а отвечают за повышение резистентности лимфоидных клеток к вирусной инфекции и трансформации и контролируются аллелями Т-1, НОІ, у-4 [3]. Резистентность или чувствительность, связанная с ГКГ, ассоциируется с аллелями В1, В6, В7, В19, В21 групп крови. В последние годы значительное внимание уделяется локусам, ассоциированным с локусами количественных признаков [2,8,9]. Публикации последних лет свидетельствуют о том, что современные методы генетического картирования позволяют выделить определенные области в геноме птиц, которые имеют отношение к врожденному иммунитету [10,11]. Представляет огромный научный и практический интерес определить эти последовательности.

В Институте птицеводства Национальной академии аграрных наук Украины в 70-80 гг. проводились исследования по выведению генетически устойчивых линий кур к вирусам лейкозо-саркомной группы. В результате была создана линия полтавских глинистых кур с повышенной устойчивостью к неопластическим заболеваниям. В связи с повышенным интересом к проблемам генетической резистентности возникла необходимость протестировать группы кур различной генеалогии на чувствительность к БМ и проанализировать их генетическую структуру по группам крови, что и являлось целью данных исследований.

Материалы и методы. Работа проведена на 4 группах суточных цыплят различной генеалогии по 51-56 голов в группе. Исследовали чувствительность к БМ кур породы полтавская глинистая (ПГ), гибрида род-айленд на серебристый леггорн (линия 10), субпопуляции Г2 борковских мясо-яичных кур и финального гибрида кросса Ломанн браун.

Определение чувствительности кур к болезни Марека проводили в остром опыте. Цыплят инфицировали вирулентным штаммом JM-P вируса БМ в суточном возрасте в дозе 1000 ЕЛД50 /0.5см3. За цыплятами наблюдали на протяжении 168 суток, учитывали причины отхода. В конце срока наблюдения выжившие куры были забиты, проведено патологоанатомическое вскрытие с целью отбора кур с признаками, характерными для БМ.

От опытных групп цыплят в 30-сут. возрасте отбирали кровь индивидуально для определения групп крови по частоте эритроцитарных антигенов согласно разработанной ранее методике [11]. Иммуногенетическое тестирование птицы проводили с использованием 31 моноспецифического реагента на группы крови.

Результаты исследований и их обсуждение. За период наблюдения наименьший отход птицы от БМ наблюдался среди кур полтавской глинистой породи (62.5%). У кур другой генеалогии гибель от БМ колебалась от 72.5-74.6 (линия 10) и кросс Ломанн браун) до 87.0% (субпопуляция Г2 борковских мясо-яичных кур) (табл. 1).

Следует отметить, что наибольший отход до 10-суточного возраста наблюдался среди цыплят полтавских глинистих кур и кросса Ломанн браун (8,9 и 9.8% соответственно). Первые одиночные случаи гибели цыплят от БМ с характерными патологоанатомическими признаками (опухоли в висцеральных органах, дистрофия с утолщением седалищного нерва) отмечены среди цыплят 37-суточного возраста гибрида род-айленд на серебристый леггорн (10 линия) , субпопуляции Г2 и кросса Ломанн браун (по 1 гол. в каждой группе). С 50-суточного возраста наблюдался более интенсивный отход птицы от БМ в 3-х группах. У полтавских глинистих цыплят первые случаи гибели от БМ зарегистрированы в 59-суточном возрасте.

Табл.1. Причины отхода птицы разных генеалогических групп кур при изучении их чувствительности к инфицированию вирусом БМ.

Породные группы	Количество кур в гр.	Срок наблюдения	Отход птицы								БМ, установленная при забое выжившей птицы
			омфалит		подагра+мочекислый диатез		расклев		БМ		голов	%
			голов	%	голов	%	голов	%	голов	%	голов	%
ПГ	56	168	5	8.9	3	5.4	2	3.6	35	62.5+0.065	0	-
10	55		2	3.6	-	-	2	3.6	41	74.55+0.059	0	-
Г2	54		4	7.4	1	1.9	-	-	47	87.03+0.046*	1	1.9
Ло-манн	51		5	9.8	1	1.96	4	7.8	37	72.51+0.063	0	-

* - Р<0.01

В ходе эксперимента была изучена генетическая структура этих четырех групп кур.

Частота встречаемости эритроцитарных антигенов в группах птицы, что погибла (код 1) или выжила после заражения (код 0), приведены в таблице 2. Только по одному эритроцитарному антигену у полтавских глинистих кур, линии 10 и субпопуляции Г-2 оказались статически значимо позитивно ассоциированными с резистентностью к болезни Марека. Среди полтавских глинистих кур в группе выжившей птицы достоверно выше частота антигена В9, в группе линии 10 – В3, в популяции Г2 - Х11. В то же время в каждой из этих групп кур выявлено по три разных эритроцитарных антигена, которые отсутствуют среди кур, что выжили. Можно предположить, что они отрицательно влияют на резистентность птицы к болезни Марека – частота проявления антигенов в обеих группах практически не отличается. Генетическое расстояние между группами птицы находится в пределах 0,118-0,434 (табл. 3). Между группами птицы чувствительной и резистентной к болезни Марека в пределах каждой породной группы (популяции) птицы расстояния значительно меньше и находятся в пределах 0,118-0,253.

Таблица 2 Частота проявления эритроцитарных антигенов в группах кур после заражения вирусом болезни Марека.

Эритроцитарные антигены		Частота проявления эритроцитарных антигенов,%
		Код группы
		ПГ-1	ПГ-0	10-1	10-0	Г2-1	Г2-0	Лом-1	Лом-0
		Количество проб
№	Обозначение	34	12	37	11	39	3	30	10
1	А12	14,7*	0,0	67,6	63,6	23,1	0,0	46,7	50,0
2	А21	17,6	8,3	43,2	27,3	30,8	33,3	36,7	50,0
3	А36	26,5	16,7	27,0	18,2	12,8	33,3	23,3	10,0
4	В2	26,5	8,3	43,2	45,5	25,6	33,3	26,7	30,0
5	В2	29,4	16,7	75,7	63,6	41,0	66,7	70,0	90,0
6	В3	20, 6	6,7	62,2*	90,9	35,9	33,3	63,3	80,0
7	В9	11,8*	41,7	43,2	27,3	79,5	100,0	60,0	60,0
8	Х3	23,5	8,3	64,9	54,5	38,5	33,3	73,3	80,0
9	Х4	23,5	8,3	54,1	45,5	25,6	33,3	56,7	80,0
10	Х11	55,9	58,3	70,3	90,9	59,0	33,3	80,0	70,0
11	Х11	5,9	25,0	56,8	54,5	56,4*	100,0	70,0	80,0
12	Х23	8, 8	0,0	54,1	45,5	56,4	33,3	63,3	70,0
13	Х32	29,4	25,0	70,3	45,5	41,0	66,7	63,3	90,0
14	Х44	44,1	50,0	43,2	45,5	56,4*	0,0	46,7	50,0
15	Х57	17,6*	0,0	13,5	18,2	15,4	0,0	10,0	20,0
16	Х71	67,6	58,3	81,1	63,6	84,6	100,0	93,3	90,0
17	Х81	17,6**	0,0	45,9	36,4	33,3	33,3	56,7	80,0
18	Х82	8,8	0,0	45,9	27,3	25, 6	0,0	30,0	50,0
19	Х84	8,8	16,7	13,5	18,2	33,3*	0,0	30,0	20,0
20	Х85	35,3	25,0	62,2	45,5	43,6*	0,0	56,7	80,0
21	Х87	14,7	8,3	16,2	27,3	51,3	66,7	30,0	10,0
22	Х88	29,4	16,7	75,7	45,5	66,7	33,3	66,7	90,0
23	Х90	0,0	0,0	10,8*	0,0	12,8	33,3	0,0	0,0
24	Х91	0,0	0,0	18,9	18, 2	5,1	0,0	0,0	0,0
25	Х92	5,9	0,0	13,5*	0,0	5,1	0,0	3,3	0,0
26	Х93	61,8	66,7	70,3	45,5	82,1	33,3	76,7	80,0
27	713	2,9	0,0	13,5	9, 1	5,1	0,0	23,3	20,0
28	765	35,3	33,3	29,7	27,3	25,6	0,0	46,7	40,0
29	714	26,5	8,3	24,3	27,3	30,8	66,7	46,7	40,0
30	720	0,0	0,0	13,5*	0,0	10,3	0,0	10,0	0,0
31	716	67,6	58,3	81,1	63,6	84,6	100,0	93,3	90,0

* - Р<0.05 ; ** - Р<0.01

Таблица 3. Генетические расстояния между опытными группами кур.

	14-1	14-0	10-1	10-0	Г2-1	Г2-0	ЛБ-1	ЛБ-2	Расстояния
ПГ-1	-	0,119	0,279	0,241	0,228	0,336	0,294	0,381	0,119-0,381
ПГ-0		-	0,340	0,295	0,247	0,343	0,343	0,434	0,119-0,434
10-1			-	0,144	0,195	0,326	0,118	0,151	0,118-0,340
10-0				-	0,215	0,328	0,175	0,239	0,144-0,328
Г2-1					-	0,253	0,168	0,262	0,168-0,262
Г2-0						-	0,298	0,371	0,253-0,371
ЛБ-1							-	0,133	0,118-0,343
ЛБ-0								-	0,133-0,434

ВЫВОДЫ
Наименьший отход птицы от БМ отмечен среди кур полтавской глинистой породы (62.5%). У кур другой генеалогии смертность от болезни Марека колебалась от 72.5-74.6 (линия 10 и кросс Ломанн браун) до 87.0% (субпопуляция Г2 борковских мясо-яичных кур).

В 3-х группах кур (полтавских глинистых, линии 10 и Г-2) выявлено по одному
эритроцитарному антигену, которые можно рассматривать, как ассоциированные с резистентностью к болезни Марека.

Полтавские глинистые куры могут представлять интерес для проведения дальнейших исследовавний по созданию птицы с генетической резистентностью к БМ.

Список литературы.
1. Weigend S., Matthers S., Solkner J., Lamont S.J. Resistance to Marek’s disease virus in White Leghorn chickens: effects of avian leukosis virus infection genotype, reciprocal mating, and major histocompatibility complex// Poultry Science, 2001, V.80, Is. 8, 1064-1072.
2. Cheng H., Niikura M., Mao W., MacLea K.S. et. al. Using integrative genomics to elucidate genetic resistance to Marek’s disease in chickens//Dev.Biol. (Basel), 2008; 132:365-372
3. Кэлнек Б.У., Виттер Р.Л. Болезнь Марека. // Болезни домашних и сельськохозяйственных птиц.- М.: «Аквариум», 2003, с.426-479.
4. Придыбайло Н.Д., Джавадов Э.Д., Смирнов М.Н., Островский М.В. Поиск альтернативного пути повышения эфективности вакцинации против болезни Марека // Вет. мед.: Міжвід. тем. наук. зб. ІЕКВМ.- Харків, 2007.- Вип. 88.-С.175179.
5. Baigent S.J., Smith L.P., Currie R.J. Vaccinal control of Marek`s disease: current challenges, and future strategies to maximize protection//Vet Immunol Immunopathol., 2006, Jul 15;112(1-2):78-86.
6. Виттер Р.Л. Путь к лучшей вакцине против болезни Марека//Эфф. птицеводство, 2007, N 3, с.34. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Вирусные болезни животных.- М.: ВНИТИБП, 1998.
7. R.L. Vallejo, L.B. Bacon, H.-Ch. Liu, R. L.Witter et. al. Mapping Quantitative Trait Loci affecting susceptibility to Marek’s disease virus induced tumors in F2 intercross chickens//Genetics, 1998; V 148:349-360.
8. E.M.Heifetz, J.E. Fulton, N,P. O’Sullivan, J.A. Arthur et. al. Mapping Quantitative Trait Loci affecting susceptibility to Marek’s disease virus in a backcross population of layer chickens//Genetics, 2007; 177(4): 2417-2431.
9. Y.H.Huang, N.Li, D.W.Burt, F.Wu. Genomic research and application in the duck (anas platyrhynchos)//World poultry science, 2008,3:329-341.
10. Keeler G.C.L.,Bliss T.B., Lavric M., Maughan M.N. A functional genomics to approach to the study of avian innate immunity// Cytogenetics genome research, 2007, 16: 139-145.
11. Подстрєшний О. П. Генетична ідентифікація і паспортизація порід і ліній птиці. Методичні рекомендації / Подстрєшний О.П., Терещенко О.В., Ткачик Т.Е., ПодстрєшнаІ., Іщенко Ю.Б; Інститут птахівництва УААН >. – Бірки, 2009. – 76 с

Подготовлено по материалам «VIого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com