Борисенкова А.Н., Новикова О.Б., ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарныйинститут птицеводства Россельхозакадемии, Санкт-Петербург, Варюхин А.В., ООО«Оргполимерсинтез СПб»

В условиях интенсивного развития птицеводства наибольшую актуальность приобретают вопросы, касающиеся эпизоотического благополучия птицехозяйств. Наряду со специфической профилактикой инфекционных заболеваний все большее значение имеет система противоэпизоотических мероприятий, включающая в себя не только мероприятия, направленные на предотвращение заноса и распространения возбудителей, а также систему контроля путем применения препаратов обладающих лечебно-профилактическим действием, дезинфицирующей активностью и широким спектром активности . Многие препараты, представленные на российском рынке, недостаточно отвечают всем требованиям практического применения- по спектру дезинфицирующей активности, технологичности применения и т.д., что очень важно при контроле, профилактике и лечении смешанных инфекций. Одной из последних разработок является Монклавит-1, который обладает уникальными возможностями использования: применяется в профилактике и лечении респираторных органов и системы пищеварения, для дезинфекции систем поения и воздуха непосредственно в присутствии птицы.

Препарат Монклавит-1 представляет собой современное высокоэффективное йод-полимерное лекарственное средство. Монклавит-1 проявляет высокую активность в отношении грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, патогенных грибов и дрожжей, блокирует дыхательные ферменты бактерий, проявляя тем самым свои бактерицидные свойства.
В фармацевтическом аспекте йод – биологически высокоактивный химический элемент и уникальное, созданное природой лекарственное вещество, являющееся основным действующим началом для большого числа медикаментов, широко применяемых в медицине и ветеринарии. Он определяет антимикробное, фунгицидное, антигельминтное, антивирусное и противопротозойное действия йодсодержащих препаратов, в особенности антисептиков. В комплексе с полимерами йод теряет свойство обжигать ткани, теряет токсичность, но сохраняет высокую бактерицидную активность, что позволило значительно расширить области применения йода как антисептического средства.

Проведёнными ранее исследованиями нами установлена эффективность Монклавита in vitro в отношении многих микроорганизмов - основных возбудителей бактериальных болезней птиц, в том числе: Salmonella enteritidis, Escherichia coli, Citrobacterfreundii, Citrobacter diversus, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus citreus, Staphylococcus epidermidis, Pasteurella multocida и другие. При испытании in vivo выявлен лечебно-профилактический эффект Монклавита в отношении сальмонелла-энтеритидис инфекции и пастереллёза птиц. В производственных условиях выявлен положительный эффект при лечении кандидомикоза птиц.

В настоящем опыте эффективность Монклавита была изучена на птицефабрике по производству пищевого яйца. С целью контроля эффективности применения препарата проводили бактериологическое исследование проб воздушной среды птичника, проб воды из поилок, групповых проб помёта клинически здоровых птиц и трупов павших кур.

Опыт был поставлен в одном птичнике с поголовьем 22 тысячи птиц. Птица кросса Ломан 770-дневного возраста содержалась в шести батареях трёхъярусных клеток. Монклавит выпаивали в течение 30 дней подряд из расчёта 8 л препарата на птичник в сутки.

Пробы воздуха, воды, помёта и трупы кур брали до применения и в процессе курса выпаивания Монклавита трёхкратно в разные сроки: на 7-й, 16-й и 24-й дни после начала дачи препарата. Каждый срок брали по 6 проб воздуха, всего 24 пробы, по 6 проб воды, всего 24 пробы, по 20 проб помёта, всего 80 проб и по 1 трупу (в связи с низким падежом), всего 4 трупа.

С целью исследования воздуха чашки с питательными средами (мясопептонный агар (МПА), солевой агар для выделения стафилококков и среда Эндо для выделения энтеробактерий) выдерживали открытыми в птичнике в течение одной минуты. Всего было 6 точек исследования на высоте 1 м от пола: по две точки в трёх проходах между батареями в начале и середине птичника. После чего чашки с МПА и со средой Эндо инкубировали в термостате в течение 24 часов при t +37,5оС, а с солевым агаром – в течение 48 часов при той же температуре.

Пробы воды брали из поилок, по одной пробе с каждой батареи, всего 6 проб в каждый срок исследования. За 4 срока было исследовано 24 пробы. Бактериологическое исследование проб проводили методом прямого посева на среды Эндо, МПА, солевой агар и висмут-сульфит агар точно отмеренных объёмов воды – по 1 мл на каждую чашку. Внесённый объём распределяли по всей поверхности чашки покачиванием, после чего подсушивали и инкубировали в термостате: среды Эндо и МПА в течение 24 часов при t +37,5оС, а солевой и висмут-сульфит агар - в течение 48 часов при той же температуре.

Групповые пробы помёта отбирали по 3-4 пробы с каждой батареи, всего 20 проб с птичника в каждый из четырёх сроков исследования. Каждую пробу массой ? 0,5 г помещали в стерильные пробирки с физиологическим раствором в объёме 4,5 мл. Пробирку тщательно взбалтывали и оставляли на 5-10 мин для осаждения. Полученную взвесь засевали в пробирки с простыми питательными средами – мясопептонным бульоном (МПБ) и скошенным мясопептонным агаром; на плотные дифференциально-диагностические среды в чашках: Эндо (для выделения энтеробактерий), солевой агар (для выделения стафилококков), кровяно-угольный эритрит-агар (для выделения кампилобактерий и микроаэрофильной микрофлоры). Для выделения сальмонелл пробы засевали на среду обогащения - селенитовый бульон, через сутки инкубирования при t +37,5оС с накопительной среды делали пересевы на висмут-сульфит агар (в чашки Петри) и инкубировали в при t +37,5оС в течение 48 часов. Чашки с кровяноугольным эритрит агаром инкубировали в термостате в микроаэрофильных условиях при t +42оС в течение 96 часов.

При исследовании трупов павших кур (одна голова до применения Монклавита и по одной голове в каждый срок исследования, всего 4 трупа) делали высевы из крови сердца, лёгких, печени, желчи, селезёнки, яичных фолликул и костного мозга на МПБ и МПА, через сутки инкубирования при t +37,5оС пересевали на среды Эндо, солевой агар.

У выросших колоний изучали морфологические, культуральные, биохимические и вирулентные свойства.

При изучении морфологии микроорганизмов производили микроскопию мазков, окрашенных по Граму. Родовую и видовую дифференциацию и идентификацию культур проводили путём изучения биохимических и ферментативных свойств с использованием трёхсахарного агара Олькеницкого, среды Симмонса, сред Гисса, реактива Эрлиха, тест-систем для биохимической идентификации энтеробактерий (СИБ) и др. Вирулентные свойства изучали на модели внутримышечного заражения цыплят.

До применения препарата в пробах воздуха были выделены культуры кокковой микрофлоры из всех точек исследования и культуры Escherichia coli из трёх точек исследования. В пробах воды выделены культуры Escherichia coli, Proteus vulgaris, кокковая микрофлора. Из групповых проб помёта выделены культуры кишечной палочки, протея и кокков, в том числе и микроаэрофильные стафилококки. Из трупа – культура Staphylococcus epidermidis из костного мозга.

У трёх выделенных культур были изучены вирулентные свойства: двух культур Escherichia coli – одной выделенной из помёта и одной, выделенной из воды, и одной культуры Staphylococcus epidermidis, выделенной из костного мозга трупа курицы. Для заражения использовали суточную бульонную культуру в дозе 0,5 мл, каждой культурой заразили по три цыплёнка в грудную мышцу. За цыплятами вели наблюдение в течение 10 дней. Весь срок цыплята были живы и клинически здоровы. При патологоанатомическом исследовании убитых на 10-е сутки после заражения цыплят не отмечено ни некроза на месте введения культур, ни макроскопических изменений в органах. Культуры заражающих штаммов при бактериологическом исследовании высевов из внутренних органов не выделены. Все культуры были авирулентны.

В первый срок исследования на 7-е сутки после начала применения препарата из проб воздуха были выделены культуры кокковой микрофлоры из всех точек исследования и культуры Escherichia coli из двух точек исследования. На второй срок исследования на 16-е сутки после начала применения препарата из проб воздуха выделены культуры кокковой микрофлоры. Культуры Escherichia coli не выделены ни в одной точке исследования. На третий срок исследования на 24-е сутки после начала
применения препарата из проб воздуха были выделены культуры кокковой микрофлоры. Культуры Escherichia coli не выделены ни в одной точке исследования. В течение применения Монклавита отмечено заметное снижение роста колоний кокковой микрофлоры воздуха во всех исследуемых точках и отсутствие роста кишечной палочки.

Из проб воды в первый срок исследования на 7-е сутки после начала применения препарата были выделены культуры Proteus vulgaris, кокковая микрофлора и культура Escherichia coli из одной пробы. Во второй срок на 16-е сутки и в третий срок на 24-е стуки из воды культуры Proteus vulgaris и Escherichia coli не выделены ни в одной пробе. Таким образом, в воде в третьем и четвёртом сроках исследование отмечено полное отсутствие роста культур Proteus vulgaris и Escherichia coli.

Из групповых проб помёта в первый, второй и третий сроки исследования выделены культуры кишечной палочки и протея, кокков. Микроаэрофильные стафилококки не выделены. В течение выпаивания Монклавита в групповых пробах помёта отмечено незначительное снижение роста культур кишечной палочки и протея, и отсутствие роста микроаэрофильных стафилококков уже в первом сроке исследования.

Из трупов кур микрофлора не выделена ни в одном сроке исследования.

В результате проведённых серий исследований установлено, что применение Монклавита методом выпаивания в указанных дозах эффективно для снижения микрофлоры воздуха и воды. Использование Монклавита позволило снизить кокковую микрофлору в воздухе (фото 1, 2, 3, 4). Применение Монклавита значительно снижает количество культур Proteus vulgaris и Escherichia coil в воде. На 16-е и 24-е сутки после начала выпаивания препарата культуры Proteus vulgaris и Escherichia coli не обнаружены ни в одной пробе (фото 5, 6, 7, 8).

Фото 1-8.

Пробы воздуха до применения препарата, рост на МПА
Пробы воздуха до применения препарата, рост на МПА

Пробы воздуха на 7-й день применения препарата, рост на МПА
Пробы воздуха на 7-й день применения препарата, рост на МПА

Пробы воздуха до применения препарата, рост на стафилококковом агаре
Пробы воздуха до применения препарата, рост на стафилококковом агаре

Пробы воздуха на 16-й день применения препарата, рост на стафилококковом агаре
Пробы воздуха на 16-й день применения препарата, рост на стафилококковом агаре

Пробы воды до применения препарата, рост на среде Эндо
Пробы воды до применения препарата, рост на среде Эндо

Пробы воды на 16-й день применения препарата, рост на среде Эндо
Пробы воды на 16-й день применения препарата, рост на среде Эндо

Пробы воды до применения препарата, рост на среде Эндо
Пробы воды до применения препарата, рост на среде Эндо

Пробы воды на 16-й день применения препарата, рост на среде Эндо
Пробы воды на 16-й день применения препарата, рост на среде Эндо

Вода является источником жизни, цыплёнок с первых минут употребляет воду и при низком санитарном состоянии её молодняк получает дополнительную условно-патогенную и патогенную микрофлору. Это негативно отражается на его развитии и дальнейшем откорме. С целью снижения микрофлоры в воде применение препарата Монклавит-1 перспективно.

РЕЗЮМЕ.
Проведенные исследования показали высокую эффективность препарата «Монклавит 1» для профилактики и лечения респираторных болезней и заболеваний желудочно-кишечного тракта у птицы. В рекомендуемых дозах препарат безвреден, обладает выраженной вироцидной, бактерицидной и фунгицидной активностью, может применяться для дезинфекции воды и воздуха в присутствии птицы.

Про результатам проведенных исследований препарат «Монклавит 1» может рекомендован к применению в промышленном птицеводстве.

Подготовлено по материалам «VIого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com