Специфическая профилактика вирусного энтерита гусей. Живая и инактивированная вакцины

Юрко Полина Сергеевна, м.н.с.; Белецкая Анна Васильевна, к.б.н.; Безрукавая Инна Юрьевна, к.в.н.; Грибкова Нина Павловна, зоотехник Институт птицеводства НААНУ, Украина

Разработана технология изготовления инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей (ВЭГ) и проведено сравнительное испытание двух схем вакцинации взрослых гусей инактивированной вакциной против вирусного энтерита Комбинированная иммунизация живой и инактивированной вакцинами родительского стада за 45 дней перед началом яйценоскости обеспечивает получение от них устойчивого к заболеванию потомства в течение 6 месяцев продуктивного периода. Лучшие результаты сероконверсии были получены при вакцинации живой и инактивированной вакцинами по сравнению с однократной иммунизацией инактивированной вакциной. Ключевые слова. Вирусный энтерит гусей, инактивированная вакцина, вакцинация, титры антител, гусята.

Вирусный энтерит гусей (ВЭГ, болезнь Держи, Enteritis viralis anserculorum) – острая контагиозная болезнь молодняка гусей и мускусных уток, которая характеризуется поражением печени, легких, катарально-геморрагическим воспалением кишечника и высокой летальностью гусят первых дней жизни [2].

Наиболее эффективным методом борьбы с вирусным энтеритом является вакцинация родительских стад, которая позволяет получать иммунный молодняк в течение продуктивного периода [5, 12].

В странах с развитым гусеводством созданы живые и инактивированные вакцины. Такие биопрепараты есть в Польше, Франции, Дании, Японии, России [3, 4, 6, 7, 8, 9, 10, 11].

Несмотря на то, что во многих странах мира разработаны средства профилактики, вопрос контроля парвовирусной инфекции остается актуальным [12].

В Украине для профилактики вирусного энтерита до 1999 года применялись живые вакцины российского производства. В связи с усложнением эпизоотической ситуации по этому заболеванию с 1999 по 2001 гг. в Институте птицеводства НААНУ разработана живая вакцина против вирусного энтерита гусей из отечественного штамма BBS-99. После проведения испытаний в лабораторных и производственных условиях в 2003 году была утверждена научно-техническая документация ТУ У 24.4.00497169.694-2003. Вакцина прошла широкую производственную проверку в 38 хозяйствах 16 областей Украины на поголовье 1200 тыс. гусей. Двухразовая вакцинация живыми вакцинами обеспечивает получение устойчивых к вирусному энтериту гусят 3 – 3,5 месяца продуктивного периода [1]. Во многих хозяйствах разных форм собственности продуктивный период продолжается 5 – 6 месяцев, поэтому гусята последних выводов не защищены от инфекции. Известно, что более продолжительный иммунитет создают инактивированные вакцины. Разработка инактивированной вакцины позволит решить проблему получения устойчивого к вирусному энтериту молодняка гусей в течение 5 – 6 месяцев продуктивного периода родительского стада.

Ц ЕЛЬ ИСЛЕДОВАНИЙ
Разработка технологии изготовления инактивированной вакцины и схемы иммунизации родительского стада гусей.

М АТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использовали культуру клеток фибробластов эмбрионов гусей; вирулентный штамм ХМ-99, который депонирован в Государственном научно-контрольном институте биотехнологии и штаммов микроорганизмов и запатентован на территории Украины (патент № 84222); инактивант этиленимин (медный комплекс) производства института химической физики (г. Москва); адъювант «Монтанид ISA-70» фирмы SEPPIC производства Франции.

Для изготовления инактивированной вакцины использовали культуральную вируссодержащую жидкость, инактивированную 0,2% этиленимином при температуре + 370С в течение 24 часов. Инактивированный антиген объединяли с адъювантом в соотношении 30х70, согласно разработанному регламенту.

Контроль полноты инактивации вируса осуществляли путем проведения пяти последовательных пассажей на культуре клеток фибробластов эмбрионов гусей.

Контроль стерильности проводили согласно ГОСТ 4483-2005. Контроль безвредности - на клинически здоровых интактных гусятах суточного возраста, которым вводили по 1,0 см3 препарата внутримышечно.

Для определения эффективности инактивированной вакцины взрослых гусей иммунизировали перед началом продуктивного периода 2-мя разными схемами (табл.1). Уровень антител исследовали в реакции нейтрализации.

Табл. 1.Схемы вакцинации родительского стада гусей

Гусят, полученных от вакцинированных родителей в течение продуктивного периода, инфицировали контрольным штаммом в дозе 1000 ЛД50 в 1 см3 в возрасте 5, 10, 15, 20 и 25 суток для установления коррелятивной связи между уровнем антител и устойчивостью к инфицированию.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЙ
Изготовлено 3 лабораторных серии инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей, которые прошли проверку в лабораторных условиях.

Две группы гусей были вакцинированы согласно указанных выше схем, с использованием одного из лабораторных образцов.

Согласно результатам, приведенным в таблице 2, применение инактивированной вакцины в двух схемах вакцинации позволяло поддерживать защитные титры антител (АТ) на уровне 6 log2 в течение 6 месяцев. Однако гуси, привитые комбинированной схемой, имели уровень антител более чем на 3 log2 выше, в отличие от гусей, вакцинированных только инактивированной вакциной.

Табл. 2 Титры АТ у гусей, вакцинированных двумя схемами.

*- среднегеометрический титр антител

От гусей, вакцинированных по двум схемам, получали 100% устойчивых к вирусному энтериту потомков в течение 6 месяцев продуктивности.

Успешно завершаются комиссионные лабораторные испытания и начаты производственные испытания инактивированной вакцины и схем вакцинации.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Разработана технология изготовления инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей с использованием культурального вирулентного штамма ХМ-99. Вакцина стерильна, безвредна. Иммуногенность препарата была на уровне 100%.

Проведено испытание двух схем иммунизации взрослых гусей перед началом яйценоскости. Лучшие результаты сероконверсии были получены при вакцинации за 45 суток до яйцекладки живой вакциной и через 14-21 день инактивированной вакциной. Титры антител у гусей, вакцинированных комбинированной схемой, в течение 6 месяцев продуктивного периода были более чем на 3 log2 выше по сравнению с однократно иммунизированными инактивированной вакциной.

От родительского стада гусей вакцинированного по комбинированной схеме (живая + инактивированная вакцины) и однократно инактивированной вакциной в лабораторных условиях в течение 6 месяцев получены устойчивые к вирусному энтериту гусята при инфицировании контрольным штаммом в дозе 1000 ЛД50 в объеме 0,5 см3.

ЛИТЕРАТУРА
1. Белецкая А.В., Безрукавая И.Ю., Грибкова Н.П. та др. Разработка и испытание вакцины против вирусного энтерита гусей // Птахівництво: Міжвід. темат. наук. зб. (Матеріали ІV Укр. конф. По птахівництву)/ ІП УААН. – Харків, 2003. – Вип. 53. – С.520-525.
2. Інструкція про заходи з профілактики та боротьби з вірусним ентеритом гусей – 2002 р.
3. Качанова, С.П. Вирусный энтерит гусей [Текст] / С.П. Качанова С.П. // Ветеринария №8, 1983г.– С. 15-23.
4. Суворов, А.В. Усовершенствование диагностики и изучение биологических свойств аттенуированных штаммов парвовируса для обоснования использования одного из них в качестве вакцины против ВЭГ[Текст] // авторефер. дис. канд. вет. наук: 16.00.03/ Суворов А. В. ИЭКВМ. – Х., 2002. – 21 с.
5. Трефилов Б.Б. Вирусный энтерит гусей (диагностика и профилактика) [Текст] / Б.Б. Трефилов, Н.В. Никитина, Л.И. Явдошка и др. // Тез. докл. научно-практического конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - С.-Петербург, 2007.
6. Трефилов, Б.Б. Разработка и внедрение средств диагностики и специфической профилактики наиболее опасных болезней птиц [Текст]: дис. докт. вет наук: 16.00.03/ Трефилов, Борис Борисович – С.-Петербург, 2000 -371 с.
7. Фадин, В.С. Иммуногенные свойства гидроокисьалюминиевой формолвакцины против вирусного энтерита гусят [Текст] / В.С. Фадин // Профилактика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. Сб. научн. трудов. – Омск, 1988г. – С. 106-112.;
8. Hansen H.C. Derzsy`s disease (parvovirusinfection has gas.) Dansk Erhvervsfjerkra. 1979, 8, 24, 423-425.;
9. Parvovirus disease or Derzsy`s gosling and wild duck disease living virus vaccine. Hoekstra`s derivate. Palmivax, 1982, p. 1.;
10. Snoflak Jan, Vachova Hana. Vakcina proti virovemu onemocneni housat (Derzsyho chorobe), Veterinarstvi, 1982, 32,1, 33-35.;
11. Takehara K. und al. Effectiveness of an inactivated goose parvovirus in Muscovy ducks. – J. Vet. Med. Sci. 1995 Dec; 57 (6): 1093-5.
12. 3rd Word Waterfowl Conference Working Group No. 8. [Text] // World’s Poultry Science Journal. – 2006.- Vol. 62, №1.- Р. 159 – 163.

Подготовлено по материалам «VIого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com