Диагностика парагриппа-3 КРС методом иммуноферментного анализа

Гринь С.А., Кузнецов Д.П., Матвеева И.Н., Кузнецова С.В., Филиппов С.Ю.
Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности, г.Щелково, Московской области

МАТЕРИАЛЫ 16-го МОСКОВСКОГО МЕЖДУНАРОДНОГО ВЕТЕРИНАРНОГО КОНГЕССА ПО БОЛЕЗНЯМ МЕЛКИХ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ 

Методом ИФА было исследовано 767 сывороток КРС на ПГ-3, полученных из различных хозяйств и определены благополучные и неблагополучные хозяйства.

Из всех исследованных сывороток произвольно взяли 107 с установленным титром в ИФА и исследовали в реакции вируснейтрализации (Таблица 1) и непрямой гемагглютинации (Таблица 2).

Таблица 1.

Сравнительная оценка титров антител к вирусу ИРТ КРС в РН и ИФА (n = 3)

Примечание: представлены данные обратные значениям титров РН и ИФА

Сравнительные исследования 107 сывороток КРС в ИФА и в РН показали, что 93 образца, которые имели в реакции нейтрализации титр антител I:4 и выше, давали в ИФА значение ОП₄₉₀ (при разведении сывороток I:100) выше 0,4. Кроме того, 14 отрицательных в реакции вируснейтрализации сывороток имели в ИФА небольшие положительные значения (ОП₄₉₀ 0,32-0,38).

Результаты, полученные в ИФA, сравнивали с результатами, полученными в РНГА. 28 сывороток отрицательных в РНГA (т.е. 26,2%) были положительны в ИФА. Коэффициент корреляции равен: r = 0,86, Р< 0,01. Обе методики ставятся без использования культуры клеток, быстры и позволяют исследовать большое количество сывороток. Преимуществом метода ИФА является его более высокая чувствительность, чем РНГА. Титры, полученные в ИФА в 10 - 20 раз выше, чем в РНГА (таблица 2).

Таблица 2

Сравнительная оценка титров анти-Пг-3 антител в ИФА и РНГA (n = 6)

*- представлены значения обратные титрам в РНГА и ИФА

Из данных таблицы 2 также видно, что чувствительность ИФА выше, чем РН. Это выражается выявлением большего числа антитело-содержащих сывороток и показателями титров их активности. 14 сывороток, давшие отрицательный результат в реакции вируснейтрализации, оказались положительными в ИФА. Титр антител в ИФА был в 50-100 раз выше, чем в РН.

Рис.1.Корреляция между титрамим анти-ПГ-3 сывороток, полученными в ИФА и РН

Рис. 2. Корреляция между титрами анти-ПГ-3 сывороток, полученными в ИФА и РНГА.

На рис.1 представлена диаграмма дисперсии результатов титрования сывороток двумя методами. Она показывает выраженную корреляцию между титрами, полученными в ИФА и РН. Коэффициент корреляции между методами высок: r = 0.94 + 0,06, Р< 0,01.

На рис.2 представлена диаграмма дисперсии результатов титрования сывороток двумя методами. Она показывает выраженную корреляцию между титрами, полученными в ИФА и РНГА. Коэффициент корреляции иежду методами высок: r=0.86, Р≤0.01

Таким образом, при сравнительной оценке уровня анти-ПГ-3 антител, полученных различными методами (РНГА, РН и ИФА), установлено, что результаты титрования сывороток в ИФА имеют высокий коэффициент корреляции (r = 0,94) с результатами РН и РНГА (r = 0,86), чувствителен, быстр в исполнениии и может быть использован при определении уровня анти- ПГ-3 антител при обследовании большого количества животных.

Summary
Gren S.A., Kouznetzov D.P., Matveeva I.N., Kouznetzova S.V., Filippov S.Yu. The ELISA test for indication virus parainfluenza-3. VNITIPB, Shelkovo, Moscow reg.
Results the determination of level antibodies virus parainfluenzathe-3 of method ELISA correlation with results of RVN and RNGA (o.94 and 0.86 corespond)