Диагностика фасциолеза крупного рогатого скота иммуноферментной реакцией

Коробов А.И., Гламаздин И.Г.
Московский Государственный университет прикладной биотехнологии (МГУПБ)

МАТЕРИАЛЫ 16-го МОСКОВСКОГО МЕЖДУНАРОДНОГО ВЕТЕРИНАРНОГО КОНГЕССА ПО БОЛЕЗНЯМ МЕЛКИХ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ

Фасциолез крупного рогатого скота - биогельминтоз, характеризующийся, как правило, хроническим течением без проявления специфических симптомов с преимущественным поражением печени и желчевыводящих путей, возбудителями которого являются трематоды F. hepatica и F. gigantica. Данный гельминтоз имеет повсеместное распространение на территории РФ, однако степень его распространения и поражения животных неоднозначна в различных природно-климатических зонах нашей страны. Можно утверждать, что в отдельных регионах более 30% поголовья скота заражены фасциолезом. В связи, с чем фасциолезная инвазия наносит значительный экономический ущерб скотоводству России, экономические потери при этом складываются из сокращения удоев молока, часто потери качества молока, уменьшения привесов и утилизации ценного пищевого продукта – печени. Наиболее неблагополучными по данному заболеванию области европейской части РФ.

Актуальность. Актуальность разработки тест-системы для прижизненной диагностики фасциолеза крупного рогатого скота на основе ИФР обусловлена необходимостью создания биологической безопасности среды за счет своевременного выявления больных животных и проведения оздоровительно-профилактических мероприятий в хозяйствах. Существующими же на сегодняшний день копрологическими методами диагностики фасциолез можно диагностировать только через 4 месяца после начала инвазии. К этому времени фасциола выделяет инвазивные фрагменты, которые загрязняют внешнюю среду и приводят к возникновению хронических заболеваний печени, что не позволяет эффективно откармливать животных и ведет к снижению качества получаемой от них продукции.

Материалы и методы. Работа выполнена на кафедре инфекционных и паразитарных болезней ветеринарно-санитарного факультета МГУПБ, в убойном цехе ОАО “Коломенский Опытный Мясокомбинат”. Нами были применены копрологические методы исследования: Фюллеборна, Дарлинга; посмертные – ветеринарно-санитарная экспертиза внутренних органов крупного рогатого скота; серологические методы исследования: ИФР. Материал для копрологического исследования отбирали на базе предубойного содержания скота, сыворотки для ИФР – на линии по убою и переработке крупного рогатого скота с последующей обязательной ветеринарно-санитарной экспертизой печени. Антиген получали из вводно-солевых экстрактов фасциол, после чего из экстракта с помощью электрофореза были выделены несколько диагностически ценных белковых фрагментов, при сочетании которых удалось создать диагностический препарат, обнаруживающий антитела в сыворотки крови у наибольшего количества животных, больных фасциолезом.

Результаты и обсуждение. Анализ проведенных исследований показал, что методами Фюллеборна, Дарлинга диагноз на фасциолез был поставлен лишь у 30% процентов зараженного скота, иммуноферментным методом – у 90% , при обязательном контроле с результатами послеубойной ветеринарно-санитарной экспертизой печени животных. В результате собственных исследований при отборе проб и анализа ветеринарной документации мясокомбината (журнал ветсанэкспертизы формы 5-вет, полугодовые отчеты о количестве выявленных случаев инефекционных и инвазионных болезней, отправляемые в районную СББЖ за 2005-2007) было установлено, что практически каждая партия крупного рогатого скота, доставляемая на убой из хозяйств Рязанской, Брянской, Курской, Тульской, Кировской и других областей в той или иной степени поражена фасциолезом. Так зараженность крупного рогатого скота в результате наших исследований и отчетности мясокомбината колебалась от 10,3 до 33,6%. Самая высокая экстенсивность и интенсивность инвазии регистрировалась в декабре-январе.

Специфичность диагностической тест-системы составила 95%, а чувствительность 85-90%. Определение чувствительности ИФР проводили на основании сопоставления результатов реакции и данных послеубойной ветеринарно-санитарной экспертизы печени животных. Чувствительность зависела от степени интенсивности инвазии. Специфичность изучали с использованием положительной сыворотки крупного рогатого скота к F. hepatica, положительной сыворотки крупного рогатого скота к Dicrocelium lancetum, положительной сывороткой крупного рогатого скота к Echinococcus granulosus; контролем служила сыворотка крови от крупного рогатого скота, при ветсанэкспертизе продуктов убоя которого не было обнаружено следов каких-либо гельминтов.

Разработанный тест на основе иммуноферментной реакции можно использовать для прижизненной диагностики фасциолеза. Он позволяет диагностировать данное заболевание уже через 1 месяц после начала инвазии, что дает возможность разработать эффективные оздоровительно-профилактические в хозяйствах по борьбе с фасциолезом.

Summary
Korobov A.I., Glamazdin I.G. ELISA test for diagnostic of cattle fasciolosis. Moscow State University of Applied Biotechnology.
The data of distribution of cattle fasciolosis are represented in this article. It is discussed an opportunity of serodiagnosis of cattle fasciolosis by ELISА method.