David Hanzlicek
Klinika JAGGY, Brno

Cytology is the study of the cell morphology and cell type patterns. Almost all body tissue and fluid is amenable to cytological examination. Gastrointestinal system could be examined as well, including rectal smear, impression smears of gastric and intestinal biopsies, liver biopsy, mesenterial lymphnodes or pancreatic cytology.

Information yield is based upon the quality of the sample, quality of the staining, resolution of the microscope and knowledge of the cytologist.
Sample quality plays a crucial role in the further cytological interpretation. The choice of the sampling technique is based on the tissue type and accessibility of the target.

The simplest technique is the imprint or smear of the sample. The procedure should be as gentle as possible. Some cells (mainly lymphoblasts) are very fragile and disruption of them disables their recognition and interpretation of the findings.

Aspiration techniques are easy and simple to perform. The free needle technique is used mainly for biopsy of soft masses and tissues like liver and lymphnodes. It involves repeated inserting the free needle into the target and then occluding the hub with the finger while removing the needle. The content from a needle is evacuated onto the slide with the air from the syringe. The negative pressure technique is indicated mainly for aspiration of firm structures and when the free needle technique failed to yield enough material. Disadvantage of this kind of sampling is more blood contamination, from this reason the aspiration should be stopped as soon as the blood is seen at the hub of the needle.

Staining should be performed after thorough drying the slide. In practice we usually use "Wright stain" and its modifications. It is quick (takes roughly 5 minutes) and stains nuclei and cytoplasmas of most cells. Giemsa-based staining (I use May-Grunwald-Giemsa staining) enable more detailed visualizing of the cell nuclei. Disadvantage is the longer staining time (usually about 20 minutes).

Cytology is often not able give definitive diagnosis in the same way as histology, however is usually able to answer following questions:

1. are the cells normal or hyperplastic?
2. are the cell types inflammatory? If yes what category of inflammation?
3. are the cells noninflammatory/tumorous? If yes of what cell origin are they?
4. do the noninflammatory/tumorous cells have features of malignancy?

Inflammatory type, based on predominant cell type include purulent (septic or aseptic), granulomatous, pyogranulomatous, eosinophilic and lympho-plasmocellular pattern. Based on the morphologic features, cellularity, connections between cells, visualization of the cell borders and degree of the blood contamination are tumorous cells divided into round-cell tumors (haematopoetic origin), epithelial (epithelioglandular origin), spindle cells (mesenchymal origin) and "free nuclei" (neuroendocrine origin).

Additional information obtained by GIT cytology could be finding of parasites, for example Giardias, in rectal smear or imprints of GIT mucosal biopsies. Finding of increased numbers or abnormal (one-type) bacteria could be a sign of antibiotic responsive enteropathy (ARE) or bacterial overgrowth (SIBO). Vacuolar changes of the cytoplasm of the hepatocytes could be seen in hepatic degenerative diseases (hepatic lipidosis or steroid induced vacuolar hepatopathy). Liver diseases associated with storage of pigments could be suspected when bile pigment, lipofuscin, hemosiderin or copper granules are found.

Цитология желудочно-кишечного тракта

Цитология занимается изучением морфологии клеток и особенностей различных клеточных типов. Почти все ткани и жидкости организма поддаются цитологическому обследованию. Желудочно-кишечная система также поддается подобному исследованию, включая ректальные мазки, мазки-отпечатки желудочных и кишечных биоптатов, биопсия печени, цитология мезентериальных лимфоузлов или поджелудочной железы.

Информационная результативность основана на качестве образца, качестве окраски, разрешении микроскопа и знаниях и опыте циотолога.
Качество образца играет критическое значение в дальнейшей цитологической интерпретации. Выбор метода взятия образца основан на типе ткани и доступности объекта. Самая простая техника это отпечаток или мазок образца. Процедура должна выполняться максимально мягко. Некоторые клетки (преимущественно лимфобласты) очень хрупкие и их деструкция сделает невозможным их распознание и интерпретацию полученных данных.

Аспирационные техники легки и просты в исполнении. Тонкоигольная аспирационная биопсия используется преимущественно для биопсии мягких образований и тканей, таких как печень и лимфатические узлы. Она заключается в повторном введение свободной иглы в целевую область и затем оттягивании поршня пальцами во время удалении иглы. Содержимое из иглы переносится на стекло вместе с воздухом из шприца. Техника с отрицательным давлением показана преимущественно для аспирации твердых структур, и когда тонкоигольная техника не способна получить достаточно материала. Минусом такой техники взятия образца является контаминация кровью. По этой причине аспирацию следует остановить, как только кровь покажется в центре иглы.

Окрашивание следует выполнять после тщательной сушки стекла. В практике мы обычно используем "метод Райта" и его модификации. Это быстро (занимает 5 минут) и окрашивает ядра и цитоплазму большинства клеток. Окраска по Гимзе (автор использует окрашивание по Мэй-Грюнвальд-Гимзе) дает более детальную визуализацию клеточного ядра. Минусом является более длительный период окрашивания (обычно около 20 минут).

Цитология, в отличие от гистологии, зачастую не способна определить конкретный диагноз, однако, она способна дать ответ на следующие вопросы:
1. являются ли клетки нормальными или гиперпластическими?

2. принадлежат ли клетки воспалительному типу? Если да, то какая категория воспаления?
3. являются ли клетки невоспалительными/опухолевыми? Если да, то какого клеточного происхождения они?
4. имеют ли невоспалительные/опухолевые клетки признаки злокачественности?

Воспалительный тип, основанный на преобладающем типе клеток, включает гнойный (септический или асептический), грануломатозный, пиогрануломатозный, эозинофильный и лимфо-плазмоклеточный образцы.

Основываясь на морфологических особенностях (насыщенность клетками, соединения между клетками, визуализация клеточных границ и степень контаминации клетками крови) опухолевые клетки делят на круглоклеточные опухоли (гемопоэтического происхождения), эпителиальные (железистоэпителиального происхождения), веретеноклеточные (мезенхимального происхождения) и "свободно ядерные" (нейроэндокринного происхождения).

Дополнительной информацией, полученной при цитологии ЖКТ, может быть обнаружение паразитов, например Giardias при ректальных мазках или отпечатках боптатов слизистой ЖКТ. Обнаружение повышенного количества или абнормальных (один тип) бактерий может свидетельствовать о реактивной на антибиотики энтеропатии или чрезмерном развитии микрофлоры. Вакуолярные изменения цитоплазмы гепатоцитов могут иметь место при дегенеративных заболеваниях печени (липидоз печени или индуцированной стероидами вакуолярной гепатопатии). Заболевания печени, связанные с накоплением пигментов, могут предполагаться при обнаружении гранул желчных пигментов, липофусцина, гемосидерина или меди.

Источник: материалы 18-Московского международного ветеринарного конгресса