Б.Г. Орлянкин
профессор, доктор ветеринарных наук, заведующий лабораторией АНО «НИИ ДПБ»

Впервые цирковирус свиней (ЦВС) был обнаружен немецкими исследователями в 1974 году, как нецитопатогенный контаминант перевиваемой культуры клеток почек поросят РК-15. В дальнейшем при обследовании свиней в ряде стран мира с развитым свиноводством (Великобритания, Германия, Бельгия, Испания, Канада, США) антитела к ЦВС были выявлены в 25-98% случаев, что свидетельствует о его широкой циркуляции в популяции свиней. Заражение поросят различного возраста (от рождения до 9 месяцев) ЦВС не сопровождалось развитием каких-либо клинических признаков и патологоанатомических изменений. В связи с этим этот вирус считают непатогенным для свиней.

В 1998 году несколькими группами исследователей из тканей поросят с синдромом послеотъемного мультисистемного истощения (СПМИ) в культуре клеток РК-15 были изолированы новые антигенно родственные между собой штаммы ЦВС, которые отличались от вируса-контаминанта. ЦВС. Обнаруженный как нецитопатогенный, контаминант перевиваемой культуры клеток РК-15 обозначили как ЦВС типа 1 (ЦВС-1), а ЦВС, вызывающий у поросят СПМИ, как ЦВС типа 2 (ЦВС-2).

ЦВС-1 и ЦВС-2 входят в состав рода Circovirus семейства Circoviridae. Геном цир- ковирусов представлен односпиральной кольцевой ковалентно-замкнутой молекулой ДНК, что и дало название семейству (circular conformation). Вирионы цирковирусов - мелкие, безоболочечные изометрические частицы диаметром 17-20,7 нм, стабильны при рН 3,0, устойчивы во внешней среде и к обработке хлороформом, сохраняют инфекционность при 700 С в течение 15 мин, не обладают гемагглютинирующей активностью. В вирионах ЦВС-1 и ЦВС-2 выявлен только один белок с молекулярной массой 28 кДа, состоящий из 234 аминокислот.

Геном ЦВС-1 состоит из 1759 нуклеотидов, а геном ЦВС-2 - из 1767-1768 нукле- отидов; между ними имеется менее 80% гомологии. Все выделенные в различных странах мира штаммы ЦВС-2 имеют близкое антигенное и генетическое родство. Идентичность нуклеотидной последовательности составляет более 94%. Определена полная первичная структура генома многих изолятов ЦВС-2, на основании которой они подразделены на две группы. В первую группу входят изоляты с длиной генома 1767 нуклеотидов (ЦВС-2Ь), во вторую - изоляты с длиной генома 1768 нуклеотидов (ЦВС-2а). Полагают, что в естественных условиях изоляты ЦВС-2Ь обладают большей вирулентностью, чем изоляты ЦВС-2а.

ЦВС-2 или цирковирусный антиген обнаруживают при различных заболеваниях свиней, включая СПМИ, синдром дерматита и нефропатии свиней (СДНС), репродуктивные нарушения и респираторные болезни свиней. Предложено все эти заболевания называть цирковирусные болезни свиней (ЦВБС).

В последние годы в ряде стран мира (США, Франция, Швейцария, Канада) выделены варианты ЦВС-2, вызывающие в естественных условиях тяжелые поражения лимфатических узлов, селезенки, легких и почек. В свиноводческих хозяйствах США в 2000 г. цирковирусные болезни поросят в периоды доращивания и откорма составляли в среднем 5,7% и 3,6%. Через 6 лет (2006 г.) число заболевших резко возросло и составило соответственно 22,3% и 31,1%, т.е. увеличилось в 3,9 и 8,6 раза. Чаще болели поросята 60-110-дневного возраста.

В настоящее время ЦВБС широко распространены в свиноводческих хозяйствах многих стран мира и причиняют значительный экономический ущерб. Так в странах ЕС потери от ЦВБС оцениваются в 600-900 млн. евро. В США экономический ущерб составляет в среднем 3-4 доллара на каждого рожденного поросенка.

Синдром послеотъемного мультисистемного истощения

СПМИ впервые был зарегистрирован в Канаде в 1991 г. у поросят в период доращи- вания. Это заболевание сопровождалось отставанием в росте, истощением, одышкой, диареей, увеличением поверхностных лимфатических узлов, бледной или желтушной окраской слизистых оболочек и кожи.

В естественных условиях СПМИ часто отмечают у 2-4-месячных поросят, редко - у животных месячного и старше 5-месячного возраста. В различных хозяйствах заболеваемость их обычно составляет 5-30% (иногда 50-60%), летальность - 70-80%. Частота и тяжесть болезни зависит от численности свиней в хозяйстве, их иммунного статуса и технологии производства. СПМИ чаще развивается у поросят, рожденных с низкой массой.

Распространение ЦВС-2 в свиноводческих хозяйствах разных стран мира оценивают по обнаружению специфических антител в сыворотке крови свиней и выявлению вируса или вирусного антигена в тканях и органах поросят. В последние годы циркуляция ЦВС-2 в хозяйствах усиливается. Серопозитивных к ЦВС-2 свиней выявляют практически во всех обследованных хозяйствах в 30-100% случаев. У диких свиней специфические антитела обнаружены в 33-89% случаев. Материнские антитела к вирусу сохраняются у поросят в большинстве случаев до 5-14-недельного возраста.

СПМИ отмечают не во всех инфицированных хозяйствах. Серологическими исследованиями, проведенными в ряде стран с развитым свиноводством (Бельгия, Испания, Великобритания, Канада, США), антитела к ЦВС-2 обнаружены у 80-95% свиноматок и молодняка на откорме, независимо от наличия или отсутствия в хозяйствах СПМИ. В группах поросят в период доращивания (11-17 недель) в хозяйствах с СПМИ серопо- зитивные к ЦВС-2 животные выявлены в 90-95% случаев, в то время как в хозяйствах без СПМИ - в 53-54% случаев. У поросят в хозяйствах без СПМИ материнские антитела к ЦВС-2 сохраняются более длительный период, чем у поросят в хозяйствах с СПМИ.

Естественное инфицирование поросят ЦВС-2 в хозяйствах с СПМИ происходит в более раннем возрасте, чем инфицирование поросят в хозяйствах без СПМИ. В последнем случае не развиваются клинические признаки болезни, а инфицирование сопровождается только иммунным ответом. Вероятно, с увеличением возраста поросят возрастает их резистентность к заражению ЦВС-2. В сыворотке крови больных поросят вирусной ДНК содержится больше, чем в таковой клинически здоровых поросят. Не обнаружено различий у штаммов ЦВС-2, выделенных от больных и клинически здоровых поросят. Последние в экспериментальных условиях вызывали заболевание.

Ретроспективными серологическими исследованиями показано, что ЦВС-2 давно циркулирует в свиноводческих хозяйствах: в Бельгии с 1969 г., Великобритании - 1970 г., Северной Ирландии - 1973 г., Канаде и США - 1985 г. При изучении возможности циркуляции ЦВС-2 у различных видов животных и человека получены неоднозначные результаты. ЦВС-2 был обнаружен в тканях абортированных плодов коров и легких телят с респираторными расстройствами, а специфические антитела - в сыворотке крови людей, крупного рогатого скота и мышей. Однако, дальнейшими исследованиями антитела к ЦВС-2 не были выявлены в сыворотке крови людей (в том числе, ветеринаров), крупного рогатого скота, лошадей, овец, коз, собак, кошек и мышей.

Источником возбудителя инфекции являются больные и латентно инфицированные свиньи разных возрастных групп, которые выделяют ЦВС-2 с фекалиями, мочой, слюной, молоком, носовыми и глазными секретами. При прямом контакте инфицированных и серонегативных поросят вирус передавался через 42 суток после заражения. Наиболее длительную персистенцию вируса (52-125 суток) отмечали в селезенке, печени, тимусе и лимфоузлах. ЦВС-2 выделялся со спермой в течение 47 суток после интраназального заражения хряков. Примерно у 30% естественного инфицированных хряков ЦВС-2 периодически выделялся со спермой в течение длительного времени (до 191 суток при 9-месячном наблюдении). Чаще выделяли вирус молодые кряки. Хряки старше 1,5 лет вирус со спермой не выделяли.

Патогенез СПМИ изучен недостаточно. После проникновения ЦВС-2 в организм поросят он интенсивно размножается в клетках лимфоидной ткани, приводит их к гибели и развитию иммунодефицитного состояния. У таких животных возникают вторичные инфекции, вызываемые условно патогенными микробами.

В естественных условиях клинические признаки болезни очень разнообразны и их чаще наблюдают у поросят через 3-4 недели после отъема. К основным признакам относятся отставание в росте и истощение. Другие признаки болезни (одышка, увеличение паховых лимфатических узлов, диарея, бледность кожи и желтуха) развиваются с различной частотой. Иногда отмечают кашель, лихорадку, атаксию, парез конечностей и внезапную гибель поросят. В хозяйствах в период вспышки болезни гибель поросят увеличивается в 3-4 раза.

На вскрытии обнаруживают увеличение многих лимфатических узлов в 2-5 раз, пневмонию, гепатит и нефрит. Иногда на селезенке отмечают инфаркты, а в желудке язвы. Гистологически постоянно выявляют интенсивное разрушение лимфоцитов в лимфоидных органах - тимусе, селезенке, лимфатических узлах.

В экспериментальных условиях СПМИ развивается только у небольшой части зараженных ЦВС-2 поросят-гнотобиотов, безмолозивных и обычных поросят. Одновременное инфицирование поросят ЦВС-2 и парвовирусом свиней или ЦВС-2 и вирусом репродуктивного и респираторного синдрома свиней (РРСС) приводило к развитию клинических признаков болезни и гибели поросят, в тканях и органах которых обнаружено большое количество антигена ЦВС-2. Следовательно, для усиления размножения и распространения ЦВС-2 в организме поросят требуются «дополнительные факторы». Усиление размножения ЦВС-2 происходит также после активации иммунной системы с помощью иммуностимуляторов или введением каких-либо вакцин. У имму- ностимулированных поросят ЦВС-2 накапливался в лимфатических узлах, селезенке и печени в 100-1000 раз больших количествах, чем у неиммуностимулированных поросят. Активация иммунной системы сопровождается размножением макрофагов, Ти В-лимфоцитов, которые являются клетками-мишенями для ЦВС-2. Этот вирус размножается в делящихся клетках и для этого требуются клеточные ДНК-полимеразы, которые синтезируются в S-фазе клеточного цикла.

В естественных условиях поросята нередко инфицированы различными вирусами, стимулирующими размножение ЦВС-2 в организме. В хозяйствах США 60% поросят с СПМИ инфицированы не только ЦВС-2, но и вирусом РРСС. Примерно 20% поросят с СПМИ инфицированы ЦВС-2 и парвовирусом свиней. В экспериментальных условиях установлено, что не только полевые изоляты вируса РРСС, но и живая вакцина усиливают размножение ЦВС-2 в организме поросят.

Диагноз на СПМИ ставят на основании трех критериев: 1) наличия клинических признаков болезни - отставание в росте, истощение, одышка, увеличение паховых лимфатических узлов; 2) обнаружения характерных микроскопических поражений на срезах лимфоидных органов - разрушение лимфоцитов, грануломатозное воспаление, тельца-включения; 3) выявления большого количества вируса или вирусного антигена в лимфоидной ткани поросят - иммуногистохимия, гибридизация in situ (на срезах).

Обнаружение только ЦВС-2 не свидетельствует о наличии заболевания, поскольку примерно у половины здоровых поросят в крови выявляют вирус.

Лечение больных поросят не эффективно. Профилактика СПМИ в хозяйствах должна быть направлена на обеспечение нормального иммунного статуса и высокой резистентности просят. Введение поросятам сыворотки крови взрослых свиней, содержащей антитела к ЦВС-2, не всегда сопровождается снижением заболеваемости.

Синдром дерматита и нефропатии свиней

СДНС впервые описан английскими исследователями в 1993 г. Полагают, что причиной болезни является ЦВС-2 и другие факторы. Поражаются, как правило, поросята 1,5-4-месячного возраста и редко взрослые свиньи. Заболеваемость обычно составляет менее 1%, летальность очень высокая (50-100%). В Великобритании в некоторых хозяйствах при вспышке СДНС гибель поросят достигала 20-60%. Клинически у больных поросят отмечают потерю аппетита, угнетение, прострацию, лихорадку, отек подкожной ткани в области живота, красные некротические поражения кожи, чаще на задних конечностях и в области промежности, кровоизлияния в коже. Наряду с СДНС у поросят может наблюдаться СПМИ, однако связь между этими заболеваниями не установлена. Гибель животных чаще происходит в результате острой почечной недостаточности.

Наибольшие поражения происходят в почках, они увеличены, плотные, в корковом слое регистрируют красноватые точечные поражения (кровоизлияния), почечная лоханка отечная. Гистологически наблюдают некротический гломерулит (воспаление почечных клубочков) и интерстициальный нефрит. Как правило, у поросят отмечают поражения кожи и почек, в редких случаях поражается или кожа, или почки. Почечные и другие лимфатические узлы могут быть увеличены в размере, на разрезе красного цвета. В селезенке иногда обнаруживают инфаркты.

Полагают, что в основе всех поражений при СДНС лежит гиперчувствительность типа III, в результате которой образуются иммунные комплексы, откладывающиеся в наибольшем количестве в сосудах кожи и почек с развитием некротического васкулита (воспаление сосудов). У поросят с СДНС в сыворотке крови обнаруживают высокий уровень иммуноглобулинов (гипергаммаглобулинемия) по сравнению с клинически здоровыми животными или с СПМИ. В преципитатах иммунных комплексов антиген ЦВС-2 не обнаружен, хотя вирус выявлен в сыворотке крови. Природа иммунных комплексов пока не известна.

Диагноз на СДНС ставят на основании двух критериев: 1) наличия клинических признаков болезни - геморрагические и некротические поражения кожи; 2) обнаружения характерных макро- и микроскопических поражений почек - кровоизлияния в корковом слое, некротический и фибринозный гломерулонефрит.

Лечение СДНС малоэффективно. СДНС необходимо дифференцировать от классической чумы свиней, особенно при инфицировании низковирулентными штаммами вируса.

В 2008 г. впервые в экспериментальных условиях был воспроизведен СДНС путем заражения 2-3-суточных поросят-гнотобиотов вирусами РРСС и TTV (torque teno virus). Вирус TTV входит с состав рода Anellovirus и широко циркулирует среди свиней, но его связь с каким-либо заболеванием не установлена. Поросята-гнотобиоты не были инфицированы ЦВС-2. Ранее СДНС не удавалось воспроизвести при заражении поросят только ЦВС-2, или ЦВС-2 и вирусом РРСС.

Репродуктивные нарушения свиней

Этот синдром впервые был зарегистрирован в Канаде в 1999 г. ЦВС-2 проникает через плаценту свиноматок и вызывает гибель эмбрионов и плодов, аборты во второй половине беременности, рождение мертвых и слабых поросят. ЦВС-2 также поражает хряков и может выделяться со спермой в течение длительного времени (белее 6 месяцев). В естественных условиях более 90% свиноматок содержат специфические антитела и репродуктивные нарушения, обусловленные ЦВС-2, встречаются относительно редко.

У мертворожденных поросят обнаруживают гипертрофию сердца и застойную гиперемию печени. В миокарде выявляют множественные некротические участки белого цвета. Гистологически наблюдают фиброзный и некротический миокардит. В миокарде плодов и мертворожденных поросят содержится большое количество антигена ЦВС-2, что свидетельствует об интенсивном размножении вируса в быстро делящихся клетках сердца.

Диагноз на репродуктивные нарушения ставят на основании трех критериев: 1) наличия клинических признаков болезни - аборты во второй половине беременности, рождение мертвых и слабых поросят; 2) обнаружения характерных макро- и микроскопических поражений сердца у мертворожденных поросят - гипертрофия сердца, фибринозный и некротический миокардит; 3) выявления большого количества вируса или вирусного антигена в пораженных участках миокарда - иммуногистохимия, гибридизация in situ.

Респираторные болезни свиней

Основными возбудителями респираторных болезней свиней являются ЦВС-2, вирус РРСС, Mycoplasma hyopneumoniae, Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida.Наиболее часто в пораженных легких обнаруживают ЦВС-2 (18-65%), вирус РРСС (12-42%), Pasteurella multocida (23-52%), Mycoplasma hyopneumoniae (14-51%). В большинстве случаев (76-88%) в легких выявляют два и более патогенов. ЦВС-2 наиболее интенсивно размножается в легких, чем другие вирусные патогенны, и поражает в 3 раза больше клеток, чем вирус РРСС. Последний усиливает размножение ЦВС-2. Антиген ЦВС-2 обнаруживают в большом количестве в эпителиальных клетках бронхиол и альвеолярных макрофагах, тогда как вирус РРСС - только в макрофагах и в меньшем количестве. Полагают, что в развитии пролиферативной и некротической пневмонии свиней основную роль играют ЦВС-2 и вирус РРСС. В отличие от СПМИ лимфоидная ткань при респираторных болезнях не поражается.

В последнее время к цирковирусным болезням свиней относят также грануломатоз- ный энтерит, некротический лимфаденит (воспаление лимфатического узла) и менин- гоэнцефалит (воспаление оболочек и вещества головного мозга). Грануломатозный энтерит, ассоциированный с ЦВС-2, обнаружен у поросят 40-70-суточного возраста. Заболеваемость их составляет 10-20%, летальность - 50-60%. Основным клиническим признаком является диарея; фекалии вначале желтого, а потом черного цвета. Гистологически отмечают грануломатозное воспаление в пейеровых бляшках кишечника и наличие цитоплазматических включений в гистиоцитах и гигантских многоядерных клетках, представляющих собой скопление ЦВС-2. Лимфатические узлы не поражаются. Лечение антибиотиками не эффективно.

Некротический лимфаденит, ассоциированный с ЦВС-2, был обнаружен в паховых лимфатических узлах и характеризовался некрозом клеток в центре лимфоидных фолликулов. В некротических клетках выявлены ЦВС-2 и вирусный антиген.
У поросят с признаками менингоэнцефалита (судороги, непроизвольные движения глаз) в головном мозге обнаруживают ЦВС-2. Полагают, что он вызывает развитие некротического васкулита (воспаление кровеносных сосудов) в мозжечке, который обеспечивает координацию движений и регуляцию мышечного тонуса. Роль ЦВС-2 в развитии нервных расстройств у свиней изучена недостаточно.

Для специфической профилактики ЦВБС разработаны и производятся четыре вакцины. Первая коммерческая вакцина изготавливается во Франции с 2004 года из инактивированного ЦВС-2 и используется для вакцинации ремонтных свинок и свиноматок. Первичную вакцинацию ремонтных свинок проводят двукратно за 5 и 2 недели до осеменения; свиноматок - за 6 и 3 недели до опороса. Ревакцинируют свиноматок однократно в период каждой последующей беременности за 2-4 недели до опороса. Защита поросят осуществляется за счет материнских антител, передающихся с молозивом (пассивный иммунитет). Вакцинация свиноматок также сопровождается улучшением репродуктивных показателей. От каждой вакцинированной свиноматки при опоросе получают на 1,0-1,4 поросенка больше, чем от не вакцинированной. Число поросят в каждом помете при отъеме увеличивается на одну голову.

В США разработана инактивированная вакцина из химерного вируса, состоящего из непатогенного ЦВС-1, в составе которого ген капсидного белка заменен на аналогичный ген ЦВС-2. Вакцину вводят поросятам однократно с 4-недельного возраста.
Рекомбинантные субъединичные вакцины разработаны в Голландии и Германии. Вакцины готовят на основе капсидного белка, экспрессированного в бакуловирусной системе. Иммунизируют поросят с 3-недельного возраста.

Все коммерческие вакцины обеспечивают значительное снижение заболеваемости и гибели поросят в периоды доращивания и откорма.

В нашей стране в НПО НАРВАК разработана рекомбинантная субъединичная вакцина «ВЕРРЕС-ЦИРКО» протии ЦВБС, которая по эффективности не уступает зарубежным аналогам.

В ряде свиноводческих комплексов иммунизировано более 40 тысяч поросят. Вакцинацию проводили однократно в 10-28-дневном возрасте. Сохранность вакцинированных поросят при передаче на откорм составляла 94,5-97,9%, а среднесуточный прирост живой массы - 374-570 г (табл.). Наилучшие результаты получены при вакцинации поросят в 3-недельном возрасте; за одну неделю до отъема поросят. Сохранность поросят в не вакцинированных группах была примерно на 20% меньше, чем в вакцинированных группах.

Эффективность рекомбинантной вакцины «ВЕРРЕС-ЦИРКО» в производственных условиях


Хозяйство

Число вакцинированных поросят

Сохранность поросят
при передаче на откорм, %

Среднесуточный прирост живой массы поросят, г

1

2429

95,3

445

2

1136

97,9

374

3

1031

94,5

570

4

957

97,5

453

Контроль

4869

73,4-78,8

354-369

Заключение

Цирковирус свиней типа 2 играет важную роль в инфекционной патологии свиней. Его обнаруживают при таких заболеваниях как синдром послеотъемного мультисистемного истощения, синдром дерматита и нефропатии, репродуктивные нарушения и респираторные болезни свиней. В экспериментальных условиях путем заражения поросят ЦВС-2 воспроизведены только синдром послеотъемного мультисистемного истощения и репродуктивные нарушения. В естественных условиях поросята нередко инфицированы различными вирусами и бактериями, которые увеличивают тяжесть поражений, вызываемых ЦВС-2. Для специфической профилактики ЦВБС в ряде стран разработаны инактивированные и рекомбинантные вакцины, которые значительно снижают заболеваемость и гибель поросят в периоды доращивания и откорма. В нашей стране в НПО НАРВАК разработана рекомбинантная субъединичная вакцина «ВЕРРЕС-ЦИРКО», не уступающая по эффективности зарубежным аналогам.

Источник: VI МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ «Актуальные ветеринарные проблемы в промышленном свиноводстве».